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RP-HPLC定量三乙胺法測定中藥黃連中鹽酸小檗堿的含量

 目的：建立一種反向高效液相色譜(RP·HPLC)法測定黃連中鹽酸小檗堿的含量。方法：采用HPLC法，色譜柱為LunaC18柱(150mm×4．60mill，5m)，流動相為乙腈-0．1％磷酸(25：75)，每lOo0ml0．1％的磷酸溶液中加入50txl的三乙胺(掃尾劑)進行洗脫；檢測波長為340nm。結果：采用HPLC法檢測黃連中鹽酸小檗堿的含量，其在0．246—2．460ixg范圍內與峰面積積分值呈良好的線性關系。平均加樣回收率為100．1％，相對標準偏差(RSD)為1．60％。結論：HPLC簡便可行、重復性好，可作為檢測鹽酸小檗堿含量的質量控制；一定量的三乙胺分析純可作為很好的掃尾劑，用于鹽酸小檗堿的含量測定。[關鍵詞]黃連；鹽酸小檗堿；高效液相色譜黃連為毛茛科植物黃連(coptischinensisfranch)、三角葉黃連(CoptisdehoideaC．Y．ChenetHsiao)或云連(CoptisteetaWall1．)的干燥根莖，主要含有小檗堿、黃連堿、藥根堿、甲基黃連堿等生物堿成分，其中以小檗堿含量最高J。《中國藥典》(2005年版)中測定黃連中小檗堿含量的方法主要為薄層色譜法j。此外，采用高效液相色譜(HPLC)法可更加精確鑒定黃連中鹽酸小檗堿及其含量。鹽酸小檗堿(Berberine)為非處方藥，具有廣泛的藥理作用。近年來國內外研究發現，在體外該類化合物濃度在每毫升微克級水平時，可抑制人白血病K562細胞、食管癌YES細胞、肝癌HepG2細胞、結腸癌colon26／colon20細胞、人早幼粒白血病HL一60細胞、人胃癌SGC一7901細胞、鼻咽癌CNE一2Z細胞等多種腫瘤細胞的生長，促進人早幼粒白血病HL-60細胞、人胃癌細胞MGC一803和SGC一7901的分化，誘導人胃癌MGC一803和BGC823細胞凋亡3J，促進Hela細胞凋亡j。作者首次使用反向高效液相色譜(RP—HPLC)法測定黃連中鹽酸小檗堿的含量，為控制黃連藥材、黃連提取物中間固體和鹽酸小檗堿片的質量提供參考。

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